Иммуногистохимический скрининг рака шейки матки в биоптатах опухоли — исследование двух маркеров для ранней диагностики дисплазии с высокой степенью риска озлокачествления: p16INK4a + Ki-67 (применение моноклональных антител к p16INK4a + Ki-67)
Иммуногистохимические методы в диагностике онкологических заболеваний
Оценка экспрессии p16INK4a + Ki-67 — исследование двух маркеров для ранней диагностики дисплазии с высокой степенью риска озлокачествления: p16INK4a + Ki-67 (применение моноклональных антител к p16INK4a + Ki-67) — тест, использующийся для выявления белка p16INK4a, являющегося непрямым маркером онкогенной экспрессии ВПЧ высокого онкологического риска при дисплазии и раке шейки матки и белка Ki-67 для определения индекса пролиферации опухолевых клеток. Рак шейки матки — одна из важнейших медицинских проблем, поскольку злокачественная опухоль часто выявляется на поздних стадиях, приводя к смерти и инвалидизации пациенток. Считается, что высокоонкогенные вирусы папилломы человека являются причиной развития шейки матки.
Вирус папилломы человека — роль в развитии рака шейки матки
Обнаружено, что вирусы ВПЧ высокого канцерогенного риска (16, 18, 31,33, 35, 39,45, 51, 52, 56, 58,59, 66, 68) обнаруживаются в опухолевых клетках при карциноме шейки матки в 93% случаев. Накоплены научные факты, свидетельствующие о том, что нарушение деления клеток после инфицирования ВПЧ может развиваться после прохождения определенных этапов. Сначала вирус ВПЧ встраивается в геном клетки человека. Далее в клетке хозяина вырабатываются белки вируса ВПЧ — Е6 и Е7, которые влияют на белки, регулирующие деление клеток человека, в частности на белок pRb. Белок Е7 инактивирует экспрессию белка pRb. Этот белок, в свою очередь, влияет на выработку белка р16ink4a, регулирующего деление клеток. Таким образом, увеличение количества онкобелков Е6 и Е7 через инактивирующее действие белка Е7 способствует повышению экспрессии белка р16ink4a. В конечном итоге это приводит к нарушению клеточных циклов деления. Выявление увеличенного количества белка р16ink4a иммуногистохимическим методом используется для подтверждения факта дисплазии (предраковое состояние) и дальнейшей опухолевой трансформацией клеток вызванной вирусом папилломы человека. Дисплазия клеток шейки матки может быть вызвана, как вирусным агентом, так и при других воспалительных заболеваниях. В ряде работ показано, что без дисплазии экспрессия белка р16ink4a не обнаруживается.
Онкобелки — маркеры опухолевого перерождения клетки
Частота выявления белка р16ink4a увеличивается по мере увеличения тяжести дисплазии шейки матки. Наличие данного белка является непрямым маркером интеграции ВПЧ в геном клетки человека и указывает на высокий риск развития рака шейки матки. Ki-67 — белок ядра клеток, связан с рибосомальным синтезом РНК. Ингибирование работы этого белка приводит к нарушению рибосомального синтеза РНК. Его определение используется в качестве маркера пролиферативной активности опухолевой клетки. Ki-67 обнаруживается во всех фазах клеточного цикла деления, кроме G0. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся, т.е. фактически указывает на скорость деления опухолевых клеток. По количеству клеток, в которых обнаруживается экспрессия Ki-67 выраженная в процентах, можно судить о степени агрессии злокачественных клеток. Чем выше процент (при норме 10-15%), тем пессимистичнее прогноз.
Основные показания для назначения
Выявление дисплазий с повышенным риском развития опухоли для ранней диагностике рака шейки матки и назначения лечения предраковых процессов; определение дальнейшей тактики лечения опухоли.
Видео по теме:
Вопрос-ответ:
Какова цель применения иммуногистохимического скрининга в диагностике рака шейки матки?
Иммуногистохимический скрининг, применяемый в диагностике рака шейки матки, позволяет выявлять специфические маркеры, такие как p16INK4a и Ki-67, на клеточном уровне. Маркер p16INK4a ассоциирован с онкогенами вируса папилломы человека (ВПЧ), широко известного своей ролью в развитии рака шейки матки. Ki-67, в свою очередь, является маркером пролиферации клеток, то есть роста и деления клеток. Совместный анализ этих маркеров помогает более точно определить наличие и степень злокачественности опухоли, что, в свою очередь, позволяет врачам лучше планировать лечение и предсказывать дальнейшее развитие заболевания.
Почему используют два маркера (p16INK4a и Ki-67) в одном тесте, а не один?
Использование двух маркеров, p16INK4a и Ki-67, в одном тесте позволяет повысить точность диагностики. p16INK4a является специфическим маркером, указывающим на активацию онкогенов вируса папилломы человека, что является важным признаком для диагностики рака шейки матки. Ki-67 показывает активность клеточного деления, что свидетельствует о пролиферативной активности опухоли. Совместное использование обоих маркеров позволяет не только подтверждать наличие вирусных онкогенов, но и оценивать агрессивность опухоли, что является критическим фактором для выбора лечения и прогноза заболевания. Таким образом, тест на оба маркера дает более полное и достоверное представление о биологической поведении опухоли.
Как проводится иммуногистохимическое исследование на маркеры p16INK4a и Ki-67?
Иммуногистохимическое исследование на маркеры p16INK4a и Ki-67 проводится следующим образом: первым этапом берется биоптат опухоли шейки матки. Ткань фиксируют и подвергают гистологической обработке, включающей заливку в парафин и нарезку тонких срезов. Затем на эти срезы наносятся специфические антитела, которые связываются с целевыми белками – p16INK4a и Ki-67. После инкубации антитела выявляются с помощью хромогенов, что позволяет визуализировать положительные клетки под микроскопом. Проще говоря, если клетки эпителия шейки матки окрашиваются — это указывает на присутствие соответствующих маркеров. Этот метод позволяет патоморфологам оценить экспрессию данных маркеров в тканях и сделать выводы о природе и степени злокачественности опухоли.
